相邻片段的体外克隆目的基因法：（1）PanhandlePCR法：在限制酶消化的DNA3’端加一个与未知序列上游已知序列互补的单链引物，从而使经变性后产生的单链DNA分子内聚合，导致己知DNA定位于未知相邻DNA侧翼区段。引物设计是该技术运用

利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。被检测的DNA碱基顺序依次读出800bp以上，sanger测序是一代所有测序和新一代所有测序的金标准。sanger测序即目前所有基因检测的国际金标准，是包括